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腸出血性大腸桿菌(Enterohaemorrhagic E.coli,EHEC)O157:H7是重要的食源性病原菌,導(dǎo)致嚴(yán)重的人獸共患病。本文旨在建立以Z0372基因?yàn)榘谢虻腜CR檢測(cè)技術(shù),特異性檢測(cè)EHEC O157:H7。以Z0372基因?yàn)榘行蛄?設(shè)計(jì)引物,建立Z0372-PCR,分析敏感性、特異性,并檢測(cè)模擬陽性污染樣品。結(jié)果表明,Z0372-PCR對(duì)純培養(yǎng)物檢測(cè)限103~104CFU/m L,模擬陽性污水樣和肉樣,增菌后檢測(cè)限10~102CFU/m L(g)。非大腸桿菌O157和其他腸道病原全部為陰性擴(kuò)增,只有腸出血性大腸桿菌O157:H7擴(kuò)增出清晰而特異的條帶。模擬陽性樣品檢測(cè),條帶特異,無任何雜帶,測(cè)序與Gen Bank序列高度同源。因此,Z0372-PCR是特異性檢測(cè)腸出血性大腸桿菌O157:H7的技術(shù),操作簡(jiǎn)便,成本低廉,適合實(shí)驗(yàn)室腸道內(nèi)容物、刮取物、污水和食品等的快速檢測(cè)。
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