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更新時(shí)間:2025.01.04
草珊瑚與金粟蘭葉片雙位點(diǎn)特異性PCR鑒別方法研究

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篩選獲得草珊瑚與金粟蘭鑒別的特異位點(diǎn)并建立雙位點(diǎn)特異性PCR方法,用于鑒別草珊瑚與金粟蘭葉片以及兩者的混雜品。采集不同產(chǎn)地的草珊瑚18份、金粟蘭6份,所有樣品提取總DNA,并對(duì)草珊瑚與金粟蘭干燥葉片進(jìn)行DNA提取。通過(guò)對(duì)其ITS片段進(jìn)行擴(kuò)增、測(cè)序,并搜索GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中收錄的草珊瑚與金粟蘭的ITS序列,進(jìn)行同源比對(duì)后根據(jù)其變異位點(diǎn)設(shè)計(jì)特異性鑒別引物,構(gòu)建多重PCR體系,并優(yōu)化PCR條件,對(duì)草珊瑚與金粟蘭葉片進(jìn)行快速分子鑒定。構(gòu)建了多重PCR鑒別體系,只經(jīng)一個(gè)PCR反應(yīng),能擴(kuò)增出草珊瑚580 bp的特異性鑒別條帶及金粟蘭470 bp的特異性片段,可快速鑒別草珊瑚與金粟蘭葉片,并可判斷相互是否混雜。使用雙位點(diǎn)特異性PCR技術(shù)可以有效快速鑒別草珊瑚與金粟蘭葉片,并可判斷相互是否混雜。

全緣葉欒樹(shù)對(duì)有機(jī)溶劑脅迫的響應(yīng)

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研究有機(jī)溶劑二甲基甲酰胺(DMF)、甲苯(TOL)對(duì)全緣葉欒樹(shù)生長(zhǎng)的影響,結(jié)果表明,DMF 20 mg/L、TOL2 mg/L或TOL0.7 mg/L+DMF 10 mg/L會(huì)引起植株死亡,說(shuō)明復(fù)合處理對(duì)全緣葉欒樹(shù)的毒性更大。DMF處理過(guò)的植株葉綠素含量下降,說(shuō)明DMF具有抑制葉綠素合成作用;可溶性總糖、丙二醛(MDA)含量變化不大,說(shuō)明DMF對(duì)養(yǎng)分積累和膜結(jié)構(gòu)影響小;可溶性蛋白含量、總抗氧化能力上升,表明DMF具有刺激植株代謝及抗氧化系統(tǒng)的作用。TOL處理過(guò)的植株谷胱甘肽含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、總抗氧化能力呈下降趨勢(shì),丙二醛含量呈上升趨勢(shì),說(shuō)明TOL對(duì)植株的抗氧化系統(tǒng)和膜結(jié)構(gòu)有一定損傷作用。DMF、TOL復(fù)合處理的葉綠素、可溶性總糖、可溶性蛋白含量下降,復(fù)合處理抑制葉綠素合成及植株養(yǎng)分積累;谷胱甘肽、SOD活性、總抗氧化能力下降,MDA含量上升,表明復(fù)合處理具有破壞植株抗氧化系統(tǒng)、損傷膜結(jié)構(gòu)的作用。

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